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二硫鍵修飾肽的高效分析與純化:選擇Phenomenex Luna的理由
更新時(shí)間:2025-10-24
點(diǎn)擊次數(shù):208

研究團(tuán)隊(duì)要合成兩類共 9 種 Capitellacin 類似物(二硫鍵修飾 + 乙烯基硫醚替代),并且完成從粗肽合成純化到活性分析。

高純度制備:
Fmoc-SPPS 合成后,粗肽經(jīng)半制備型 Luna 柱純化,最終獲得純度 > 95% 的類似物,為后續(xù) MIC(最小抑菌濃度)和 CD(圓二色譜)實(shí)驗(yàn)提供 “無雜質(zhì)干擾" 的樣品基礎(chǔ);
異構(gòu)體分離:
合成乙烯基硫醚類似物時(shí),曾出現(xiàn)熱力學(xué) / 動(dòng)力學(xué)異構(gòu)體混峰,Luna 柱憑借獨(dú)特選擇性,可以觀察到不同異構(gòu)體峰(如 “Dap18" 類似物的兩個(gè)同質(zhì)量雜質(zhì)峰),幫團(tuán)隊(duì)鎖定了保護(hù)基遷移的關(guān)鍵問題;

活性關(guān)聯(lián):
研究發(fā)現(xiàn) “疏水度(RP-HPLC 保留時(shí)間)與大腸桿菌活性正相關(guān)"——Luna 柱的穩(wěn)定保留時(shí)間重復(fù)性,讓這一關(guān)聯(lián)分析有了可靠的數(shù)據(jù)支撐,直接助力揭示抗菌肽活性規(guī)律。

Luna 已經(jīng)成為世界上廣為應(yīng)用的反相色譜柱,因?yàn)樗冀K將目光交集在色譜分離的
兩個(gè)重要指標(biāo):分離度和峰形。獨(dú)特鍵合技術(shù)造就的高柱效和高鍵合相表面覆蓋度使其始終能得到尖銳的色譜峰。

多肽分子極性差異小、易出現(xiàn)共洗脫,對(duì)色譜柱的選擇性和穩(wěn)定性要求高。而 Luna C18 柱恰好踩中了這些需求點(diǎn):
適用性穩(wěn)定:
實(shí)驗(yàn)中用到 “5% B 到 65% B 梯度洗脫"“65℃流動(dòng)相溫度",Luna 柱全程穩(wěn)定,無柱效下降問題;
選擇性優(yōu)秀:
無論是 20 殘基的天然抗菌肽,還是帶乙烯基硫醚 / 二硫鍵的修飾類似物,都能實(shí)現(xiàn)基線分離;
擴(kuò)展性一致:
從分析型(4.6mm×250mm)用于粗肽分析,到半制備型用于樣品純化,一套柱子覆蓋 “分析 - 制備" 全流程,減少方法轉(zhuǎn)移的麻煩。
科研人的 “靠譜工具",從來都不是 “背景板"
在這篇研究里,Luna 柱不只是 “分離工具"—— 它幫團(tuán)隊(duì)確認(rèn)了 “子-彈類似物對(duì)大腸桿菌的選擇性活性",驗(yàn)證了 “乙烯基硫醚作為二硫鍵替代物的可行性",甚至為 “疏水度預(yù)測(cè)活性" 提供了量化依據(jù)。可以說,每一個(gè)關(guān)鍵結(jié)論的背后,都有精準(zhǔn)色譜數(shù)據(jù)的支撐。
如果你也在做肽類合成、抗菌肽篩選,或者需要穩(wěn)定可靠的反相色譜方案,不妨試試 Phenomenex Luna C18 柱 —— 畢竟,好的工具,能讓科研效率翻倍!
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